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  • Autor Autor Carlos Arreola
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Abstract​

Methylisothiazolinone (MIT) and chloroxylenol (PCMX) are popular disinfectants often used in personal care products (PCPs). The unregulated discharge of these micropollutants into the environment, as well as the use of sewage sludge as fertilizer and reclaimed water in agriculture, poses a serious threat to ecosystems. However, research into their ecotoxicity towards nontarget organisms is very limited. In the present study, for the first time, the ecotoxicity of biocides to Pseudomonas putida, Pseudomonas moorei, Sphingomonas mali, and Bacillus subtilis was examined. The toxicity of MIT and PCMX was evaluated using the microdilution method, and their influence on the viability of bacterial cells was investigated by the AlamarBlue® test. The ability of the tested bacteria to form biofilms was examined by a microtiter plate assay. Intracellular reactive oxygen species (ROS) production was measured with CM-H2DCFDA. The effect of MIT and PCMX on phytohormone indole-3-acetic acid (IAA) production was determined by spectrophotometry and LC‒MS/MS techniques. The permeability of bacterial cell membranes was studied using the SYTOX Green assay. Changes in the phospholipid profile were analysed using LC‒MS/MS. The minimal inhibitory concentrations (MICs) values ranged from 3.907 to 15.625 mg L−1 for MIT and 62.5 to 250 mg L−1 for PCMX, indicating that MIT was more toxic. With increasing concentrations of MIT and PCMX, the cell viability, biofilm formation ability and phytohormone synthesis were maximally inhibited. Moreover, the growth of bacterial cell membrane permeability and a significantly increased content of ROS were observed, indicating that the exposure caused serious oxidative stress and homeostasis disorders. Additionally, modifications in the phospholipid profile were observed in response to the presence of sublethal concentrations of the chemicals. These results prove that the environmental threat posed by MIT and PCMX must be carefully monitored, especially as their use in PCPs is still growing.

Subject terms: Environmental biotechnology, Environmental microbiology, Microbiology techniques
 
Resumen

El metilisotiazolinona (MIT) y el cloroxylenol (PCMX) son desinfectantes populares que a menudo se utilizan en productos de cuidado personal (PCPs). La descarga no regulada de estos microcontaminantes en el medio ambiente, así como el uso de lodos de depuradora como fertilizante y agua reciclada en agricultura, representa una grave amenaza para los ecosistemas. Sin embargo, la investigación sobre su ecotoxicidad hacia organismos no objetivo es muy limitada. En el presente estudio, se examinó por primera vez la ecotoxicidad de los biocidas hacia Pseudomonas putida, Pseudomonas moorei, Sphingomonas mali y Bacillus subtilis. La toxicidad de MIT y PCMX se evaluó utilizando el método de microdilución y se investigó su influencia en la viabilidad de las células bacterianas mediante la prueba de AlamarBlue®. La capacidad de las bacterias probadas para formar biopelículas se examinó mediante un ensayo en placa de microtitulación. Se midió la producción de especies reactivas de oxígeno intracelulares (ROS) con CM-H2DCFDA. El efecto de MIT y PCMX en la producción de la fitohormona indol-3-acético (IAA) se determinó mediante técnicas espectrofotométricas y LC-MS/MS. Se estudió la permeabilidad de las membranas celulares bacterianas utilizando el ensayo SYTOX Green. Los cambios en el perfil de fosfolípidos se analizaron utilizando LC-MS/MS. Los valores de las concentraciones inhibitorias mínimas (MIC) oscilaron entre 3,907 y 15,625 mg L−1 para MIT y de 62,5 a 250 mg L−1 para PCMX, lo que indica que MIT era más tóxico. Con el aumento de las concentraciones de MIT y PCMX, la viabilidad celular, la habilidad de formación de biopelículas y la síntesis de fitohormonas se inhibieron al máximo. Además, se observó el crecimiento de la permeabilidad de la membrana celular bacteriana y un contenido significativamente aumentado de ROS, lo que indica que la exposición causó estrés oxidativo grave y trastornos de la homeostasis. Además, se observaron modificaciones en el perfil de fosfolípidos en respuesta a la presencia de concentraciones subletales de los productos químicos. Estos resultados demuestran que la amenaza ambiental que representan MIT y PCMX debe ser cuidadosamente monitoreada, especialmente porque su uso en PCPs sigue creciendo.

Términos del tema: Biotecnología ambiental, Microbiología ambiental, Técnicas de microbiología.
 
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que es iddqd y idkfa y dncross y dnstuff y otros ejemplos dalos tú
Ah, ¡ahora entiendo tu pregunta! iddqd e idkfa son códigos que pertenecen a un videojuego llamado "Doom". "iddqd" es un código que hace que tu personaje sea invencible, mientras que "idkfa" te da todas las armas y municiones del juego.

"IDCLEV" es otro código en Doom que te permite saltar niveles, mientras que "dncross" es un comando usado en el juego "Half-Life" para deshabilitar la mira del arma. "dnstuff" es un truco en el juego "Blood" que te lleva a una habitación secreta donde se encuentran objetos y municiones.

También hay otros códigos y trucos en muchos otros juegos de video populares, aunque cada uno tiene sus propias combinaciones únicas de teclas o comandos.
 
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Introduction​

Currently, much attention is given to the pollution of the natural environment with toxic compounds of anthropogenic origin. Mass production and application of synthetic chemicals increase this threat. One of the groups of pollutants is micropollutants, which are not covered by existing statutes due to their low accumulation in the environment (i.e., ng L−1 up to µg L−1). These contaminants have been introduced into ecosystems for many years, but current advances in analytical processes have allowed the detection of their presence (despite their low quantities in the environment)1. Among these micropollutants, personal care products (PCPs) and household chemicals are important emerging contaminants. PCPs form an integral part of the daily lives of humans and include skincare products, hair care formulations, toothpastes, soaps, sunscreens and perfumes. These chemicals are pervasive in the environment due to their incomplete elimination by conventional biological wastewater treatment systems. Although most PCPs are considered readily biodegradable in environmental matrices, their threat to the environment is not due to persistency but rather to their biological activity together with their continuous emission, which characterizes them as “emerging contaminants” or “prospective pollutants”2,3.
 
Actualmente, se presta mucha atención a la contaminación del medio ambiente natural con compuestos tóxicos de origen antropogénico. La producción y aplicación en masa de productos químicos sintéticos aumenta esta amenaza. Uno de los grupos de contaminantes son los microcontaminantes, los cuales no están cubiertos por las leyes existentes debido a su baja acumulación en el medio ambiente (es decir, de ng L−1 a µg L−1). Estos contaminantes han sido introducidos en los ecosistemas durante muchos años, pero los avances actuales en procesos analíticos han permitido detectar su presencia (a pesar de sus bajas cantidades en el medio ambiente). Entre estos microcontaminantes, los productos de cuidado personal (PCPs) y los productos químicos para el hogar son importantes contaminantes emergentes. Los PCPs forman una parte integral de la vida diaria de los humanos e incluyen productos para el cuidado de la piel, formulaciones para el cabello, pastas dentales, jabones, protectores solares y perfumes. Estos productos químicos son pervasivos en el medio ambiente debido a su eliminación incompleta por los sistemas convencionales de tratamiento de aguas residuales biológicas. Aunque la mayoría de los PCPs se consideran fácilmente biodegradables en las matrices ambientales, su amenaza para el medio ambiente no se debe a su persistencia, sino a su actividad biológica junto con su emisión continua, lo que los caracteriza como "contaminantes emergentes" o "contaminantes prospectivos".
 
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Chloroxylenol (PCMX, 4-chloro-3,5-dimethylphenol, p-chloro-m-xylenol) and methylisothiazolinone (MIT, 2-methyl-4-isothiazolin-3-one) are broad-spectrum antimicrobial agents that are used extensively in industrial, consumer and health care products, including cosmetics, household chemicals and disinfection products such as preservatives or disinfectant agents4,5. PCMX is a to strong antimicrobial capable of reducing populations of bacteria, such as Pseudomonas aeruginosa, Escherichia coli, Proteus vulgaris, and Salmonella typhi, and fungi, such as Aspergillus niger, Aspergillus flavus, Candida albicans and Candida parapsilosis. Moreover, the virucidal activity of PCMX towards Ebola virus and severe acute respiratory syndrome coronavirus 2 (SARS-CoV-2) has been confirmed, making it widely used for disinfection during the SARS-CoV-2 pandemic611. Generally, it is assumed that the mechanism of action of chloroxylenol is similar to that of other phenolic and halophenolic antibacterial agents, particularly those perturbing cell membranes and causing cell leakage4,12. MIT, which is the best representative of preservatives from the isothiazolinones group, is a powerful biocide and has been described to be able to diffuse across the bacterial cell membrane and the cell wall of fungi. The main mechanism of the inhibitory effect is based on the presence of a reducing sulfur in the MIT molecule. Sulfur is able to react with nucleophilic groups in cellular components and inactivate thiols in cellular proteins to form disulfide bonds (-S-S-). By blocking several specific enzymes, isothiazolinones effectively stop respiration and inhibit the synthesis and utilization of adenosine triphosphate (ATP), which inhibits cellular activity and ultimately causes bacterial and fungal cell death. Moreover, ROS accumulate because the vital pathways in cellular metabolism are disrupted; this accumulation leads to cellular death1317.
 
El cloroxylenol (PCMX, 4-cloro-3,5-dimetilfenol, p-cloro-m-xileno) y la metilisotiazolinona (MIT, 2-metil-4-isotiazolin-3-ona) son agentes antimicrobianos de amplio espectro que se utilizan extensamente en productos industriales, de consumo y de cuidado de la salud, incluyendo cosméticos, productos químicos para el hogar y productos desinfectantes como agentes conservantes o desinfectantes4,5. El PCMX es un antimicrobiano demasiado fuerte capaz de reducir las poblaciones de bacterias, como Pseudomonas aeruginosa, Escherichia coli, Proteus vulgaris, y Salmonella typhi, y hongos, como Aspergillus niger, Aspergillus flavus, Candida albicans y Candida parapsilosis. Además, se ha confirmado la actividad virucida del PCMX hacia el virus del Ébola y el coronavirus del síndrome respiratorio agudo severo 2 (SARS-CoV-2), lo que lo hace ampliamente utilizado para la desinfección durante la pandemia de SARS-CoV-2611. Generalmente, se asume que el mecanismo de acción del cloroxylenol es similar al de otros agentes antibacterianos fenólicos y halofenólicos, en particular aquellos que perturban las membranas celulares y causan la fuga celular4,12. La MIT, que es el mejor representante de los conservantes del grupo de las isotiazolinonas, es un biocida potente y se ha descrito como capaz de difundirse a través de la membrana celular bacteriana y la pared celular de los hongos. El mecanismo principal del efecto inhibitorio se basa en la presencia de azufre reductor en la molécula de MIT. El azufre es capaz de reaccionar con grupos nucleófilos en los componentes celulares e inactivar tiolos en proteínas celulares para formar enlaces disulfuro (-S-S-). Al bloquear varias enzimas específicas, las isotiazolinonas detienen efectivamente la respiración e inhiben la síntesis y utilización de trifosfato de adenosina (ATP), lo que inhibe la actividad celular y finalmente causa la muerte celular bacteriana y fúngica. Además, las especies reactivas de oxígeno (ROS) se acumulan porque se interrumpen las